冲洗： 材料自固定液中取出后，需立即冲洗，使其中所有的固定液全部除去，以妨碍染色 有些固定液，如10%福尔马林液、Bouin氏液固定的材料，若时间较短的话可不必冲洗。但时间过长亦需冲洗 3、脱水（37度恒温箱） 所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来，以利于有机溶剂的渗入，这一过程称为脱水。 脱水是否彻底，直接关系到组织是否能充分透明 脱水过度（原因是组织在纯酒精内时间过久，发生组织质地发生变化）容易造成组织发脆。造成组织发脆的原因还有加温（温度超过36℃）、脱水剂内加有丙酮、浸蜡用的石蜡
中二甲苯过多等等。一般我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关，而忽视了与低浓度的酒精关系，其实低浓度的酒精具有强大的穿透力，比纯酒精更容易渗透到组织块内部使之脱水，组织如果在低浓度酒精里充分脱水，在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份，因此，仅需短时间就可完成，如果这时不缩短纯酒精的时间，便会引起组织发脆；如果脱水时加温，使用丙酮，还可引起组织收缩，并影响免疫组织化学的标记.
组织固定后，要除去组织中渗入的固定液和固定液产生的沉淀、结晶、色素等物质，否则会影响以后的染色效果，该过程即为固定后处理。处理方法要根据固定液来选择，经过中性多聚甲醛固定的组织一般采用流水冲洗24小时来处理（在流水冲洗之前，可对组织块进行适当的修整，便于bao埋和切片的制作）。此外，含钙组织，如：骨、牙齿等，在冲洗之后还应进行脱钙处理。一般采用EDTA对含钙组织尽行脱钙处理，此法对组织无损伤，脱钙速度慢，酶活性保留，对组织抗原损伤小。
常规切片制备的操作流程及要求
㈠社团块依序进行：①水洗，②脱水，③透明，④浸蜡，⑤bao埋和⑥切片。 ㈡社团切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为易燃、有毒物，必须专人管理，2m以内不患上有有焰的火，局部环境应有良好的透风和救火设施。 ㈢常规切片的手工操作（步骤次序和各步骤的持续时间） 1．水洗：用水流冲洗已经固定的社团块30min。 2．脱水（常温下） （1）乙醇－甲醛（AF）液固定 60~120min （2）80%乙醇 60~120min （3）95%乙醇Ⅰ 60~120min （4）95%乙醇Ⅱ 60~120min （5）无水乙醇Ⅰ 60~120min （6）无水乙醇Ⅱ 60~120min （7）无水乙醇Ⅲ 60min ［注意事项］①未经充分固定的社团不患上进入脱水程序。②用于脱水的试剂容积应为社团块总体积的5～10倍以上。③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水。④脱水试剂应及时过滤、更换（500ml乙醇可用于500个社团块脱水；加入硫酸铜的无水乙醇变蓝时，提示需要更换）。⑤较大社团块的脱水时间长于较小者，应将两者分隔进行脱水。⑥社团置于无水乙醇内的时间不宜过长（以免硬化）。⑦丙酮脱水性能强，会使社团块过缩、硬脆，不宜用以替换无水乙醇。
广告
